探索一种高效的无透明带胚胎培养方法,为手工核移植提供技术支持,研究以小鼠(Mus musculus)胚胎为材料,对比了现有的3种无透明带胚胎培养方法,对其中效果较好的WOW(the well of the well)法进行改进,以海藻酸钙凝胶包埋小凹,并且尝试与共培养技术相结合.结果显示,海藻酸钙凝胶包埋小凹法(AEW法)的囊胚发育率(54.7%)和囊胚细胞平均数(54.3)显著高于微滴单卵培养法(MDS法)和琼脂柱包埋培养法(AE法)(P＜0.05),与WOW法相当(P＞0.05);使用AEW法进行培养时,最佳的海藻酸钠和钙离子浓度分别为0.7%和1.5%;该法与颗粒细胞共培养相结合后,胚胎卵裂率(89.7%)与囊胚发育率(67.9%)显著高于对照组(分别为79.5%和54.7%)(P＜0.05).实验结果表明,AEW法培养无透明带胚胎的效果优于其它几种方法;AEW法与颗粒细胞共培养相结合可以大大提高无透明带胚胎的胚胎卵裂率及囊胚发育率.
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