当归补血汤促进大鼠骨质疏松性骨折愈合及调节Wnt/β-catenin通路作用研究

摘要

目的 研究当归补血汤对大鼠骨质疏松性骨折愈合的促进作用及对Wnt/β-catenin通路的调节作用。方法 大鼠随机分为正常对照组及造模组,造模组采用摘除卵巢及股骨中断锯断法建立骨质疏松性骨折大鼠模型,造模完成后随机分为骨质疏松性骨折组、当归补血汤低、中、高剂量组及阿仑膦酸钠组,当归补血汤低、中、高剂量组分别按照2.5、5、10 g/kg(以生药含量计)的剂量灌胃给予大鼠当归补血汤,阿仑膦酸钠组按照0.5 mg/kg灌胃给予大鼠阿仑膦酸钠,正常对照组及骨质疏松性骨折组大鼠灌胃给予生理盐水,每日1次,连续8周,使用骨密度检测仪测定各组大鼠右后肢股骨密度,使用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测大鼠血清TNF(肿瘤坏死因子)-α、IL(白介素)-1β、血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)水平,万能生物力学试验机检测大鼠股骨弹性模量、最大应力、最大承受力,苏木精-伊红(HE)染色法检查大鼠股骨组织病理学变化,分别使用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及免疫印迹法(Western blot)测定大鼠股骨组织Wnt3a、DKK1、Runx2及β-catenin mRNA及蛋白水平。结果 与正常对照组比较,骨质疏松性骨折组大鼠骨密度、股骨弹性模量、最大应力及最大承受力,Wnt3a、DKK1、Runx2、β-catenin mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05),大鼠血清TNF-α、IL-1β、ALP、OC水平显著升高(P<0.05);与骨质疏松性骨折组比较,当归补血汤低、中、高剂量组及阿仑膦酸钠组大鼠骨密度、股骨弹性模量、最大应力及最大承受力,Wnt3a、DKK1、Runx2、β-catenin mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05),大鼠血清TNF-α、IL-1β、ALP、OC水平显著降低(P<0.05),且各项指标变化与当归补血汤的剂量呈依赖性。结论 当归补血汤能够显著提高骨质疏松性骨折大鼠的骨密度,改善大鼠骨生物力学指标,调节骨代谢水平,其机制可能与调节Wnt/β-catenin通路有关。