中草药重要功能成分α-法尼烯检测方法建立

摘要

目的α-法尼烯在一系列中草药中发挥着重要作用。本研究将利用生物合成法合成α-法尼烯,并建立一种灵敏、快速检测细胞提取物中α-法尼烯成分的方法。方法通过构建表达α-法尼烯合酶质粒,将其转入大肠杆菌,诱导该酶在细菌内进行表达并利用大肠杆菌MEP途径的代谢产物法尼基焦磷酸(FPP)作为底物,生产α-法尼烯;经正十二烷萃取,以氦气为载气上样,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法进行分析。检测9.21 min 出峰物质,对其结构进行质谱分析,确定产物为α-法尼烯。结果细胞提取物中α-法尼烯产物含量为3.63 mg/L。GC-MS可以检测浓度低至50 g/L的α-法尼烯。结论通过GC-MS建立了高效灵敏的α-法尼烯检测方法。