基于逆转录-环介导等温扩增技术快速检测发热伴血小板减少综合征病毒方法的建立

摘要

目的 建立1种快速、特异、灵敏的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的检测方法.方法 针对SFTSV M基因保守区域的核酸序列,设计逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)特异性引物,优化反应体系和条件.用毛细管电泳法和横向流动试纸条(LFD)法检测扩增产物,建立RT-LAMP检测方法.进行敏感性、特异性检验,并与Real-time RT-PCR法进行比较.结果 以LFD法和毛细管电泳法检测RT-LAMP扩增产物具有相同的敏感性和特异性;RT-LAMP-LFD检测SFTSV的敏感性为10 copies RNA分子/反应,且与其他病毒无交叉反应.RT-LAMP-LFD和Real-time RT-PCR检测临床标本阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),2种方法一致性好(Kappa=0.918).结论 建立的RT-LAMP方法快速、简单、操作简单,具有较高的敏感性和特异性,适合应用于基层单位和现场SFTSV的快速检测.