黄芩素对Aβ诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的研究黄芩素对β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein, Aβ）诱导PC12细胞损伤的保护作用, 探讨其作用机制。方法采用MTT法检测各组细胞活性, 筛选黄芩素安全有效浓度;将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、Aβ组、黄芩素组、雌二醇组。接种24 h后, 黄芩素组给予1×10-6 mol/L黄芩素溶液进行干预, 雌二醇组给予1×10-5 mol/L雌二醇溶液进行干预。2 h后, 除空白组外, 其余各组加入1.5×10-4 mol/L Aβ进行干预造模。培养24 h后使用MTT法测定各组细胞活性。采用氧化试剂盒检测各组细胞SOD、GSH-PX、LDH含量。RT-PCR法检测各组细胞caspase-3 mRNA水平。Western blotting检测各组细胞p-PI3K、p-AKT、caspase-3蛋白表达。结果与Aβ组比较, 黄芩素组、雌二醇组PC12细胞存活率[（96.348±0.571）%、（97.183±0.714）%比（86.922±0.429）%]升高（P＆0.01）;细胞SOD[（54.31± 1.34）U/mgprot、（57.38±2.25）U/mgprot比（36.18±2.24）U/mgprot]、GSH-PX[（4.46±0.23）U/mgprot、（4.72± 0.31）U/mgprot比（2.05±0.37）U/mgprot]活性升高（P＆0.01）, LDH[（85.43±0.92）nmol/ml、（82.46± 0.27）nmol/ml比（99.17±0.52）nmol/ml]水平降低（P＆0.01）;细胞caspase-3[（2.24±0.64）、（2.33±0.75）比（3.46±0.46）]mRNA及p-PI3K[（0.46±0.03）、（0.44±0.06）比（0.66±0.09）]、p-AKT[（0.43±0.05）、（0.41± 0.02）比（0.58±0.03）]、caspase-3[（0.61±0.03）、（0.56±0.53）比（0.92±0.07）]蛋白表达降低（P＆0.01）。结论黄芩素可通过抑制PI3K/AKT通路蛋白表达, 减轻细胞凋亡及氧化反应, 减少Aβ对PC12细胞的损伤。