miR-155-SIRT1在柴油机尾气暴露大鼠氧化应激和气道炎症中的作用

摘要

目的探讨长期暴露柴油机尾气（DEE）对肺部炎症的影响以及潜在的机制。方法 30只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为DEE组和对照组, 每组15只。DEE组暴露于含有3 mg/m3柴油机排气微粒的DEE中12周, 对照组暴露于净化空气中12周。使用酶联免疫吸附试验或高效液相色谱-串联质谱法检测尿液中2-羟基菲、9-羟基菲、8-羟基-2-脱氧鸟苷、丙二醛水平, 血液和支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素8（IL-8）、IL-6和肿瘤坏死因子α水平;肺组织病理切片观察肺炎症和重塑变化;荧光定量聚合酶链反应测定肺组织中miR-155水平;蛋白质印迹测定肺组织中沉默信息调节因子1（SIRT1）表达;通过双荧光素酶报告实验和免疫共沉淀实验验证miR-155与SIRT1的相互作用。结果 DEE组大鼠尿中2-羟基菲、9-羟基菲、8-羟基-2-脱氧鸟苷、丙二醛水平, 血清和BALF中IL-8、IL-6和肿瘤坏死因子α水平, BALF中白细胞总数、中性粒细胞、嗜酸粒细胞和淋巴细胞数均显著高于对照组（P值均＆0.001）, 肺组织切片中气道炎症及重塑加重。与对照组比较, DEE组大鼠肺组织中miR-155水平升高（t=21.854, P＆0.001）, SIRT1表达下降（t=25.580, P＆0.001）。miR-155模拟物下调SIRT1野生型细胞的荧光强度, 而SIRT1在miR-155组中优先富集。结论 DEE暴露加重大鼠气道炎症和氧化应激, 可能与miR-155下调靶标SIRT1表达水平有关。