miR-301a-3p通过靶向调节SNX27影响脊髓神经损伤修复

摘要

目的 研究miR-301a-3p在脊髓损伤组织和神经细胞中的表达情况及其在神经损伤修复过程中的作用.方法 建立SD大鼠脊髓损伤(SCI)模型,用qPCR和Western blot检测miR-301a-3p和分类连接蛋白(SNX27)的表达量;利用150μM H2 O2诱导PC12神经细胞损伤;采用流式细胞术和Western blotting检测细胞凋亡以及凋亡相关蛋白和轴突相关蛋白的表达量,双荧光素酶报告基因分析验证miR-301a-3p对SNX27的相互作用关系.结果 损伤脊髓组织中miR-301a-3p的表达下调,与SNX27呈现相反的表达模式.将miR-301a-3p mimic或miR-301a-3p inhibitor转染至PC12细胞中能够明显抑制或促进H2 O2诱导的神经细胞凋亡,并促进或抑制神经轴突相关蛋白Gap-43和NF-200的表达.运用生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、qPCR和Western blot证实SNX27是miR-301a-3p的靶基因.将腺病毒SNX27过表达载体(Ad-SNX27)转染至PC12细胞可拮抗miR-301a-3p对H2 O2处理后细胞凋亡的抑制作用,以及神经轴突再生能力的促进作用.结论 本研究表明miR-301a-3p可通过抑制SNX27的表达促进SCI后的神经功能修复,提示miR-301a-3p可能是脊髓损伤治疗的潜在靶点.