一套适合烤烟3种RNA病毒的RT-PCR检测方法

摘要

烤烟是贵州省的重要经济作物,但是烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒(PVY)3种RNA病毒在贵州烤烟产区造成巨大损失.3种病毒引起的症状相似性造成了田间诊断的困难.针对贵州烟区的样品,开发了一套包含了靶向3种病毒外壳蛋白基因特异性片段的RT-PCR检测方法.3对引物涵盖的基因片段长度分别为:TMV-120 bp,CMV-240 bp,PVY-660 bp,退火温度均为55?C.通过1次PCR反应,就可以根据扩增条带的大小判断病毒的种类,还可以检测复合侵染的样品中2种病毒与3种病毒混合DNA的种类.该方法非常适合基层检测站点快速和高效地检测大批量烟叶样品,指导后续防控工作的开展.