狂犬病毒P和M基因重组突变体的拯救及特性研究

摘要

为探究狂犬病毒P和M基因对其生物学特性的影响,本研究以弱毒疫苗株rRC-HL为骨架,利用反向遗传技术将广西街毒株GX01和GX074的P和M基因分别组合替换rRC-HL株相应的基因进行联合突变,拯救获得重组突变体,应用间接免疫荧光实验和RT-PCR对重组突变体鉴定,测定多步生长曲线将亲本弱毒株和重组突变体进行生长特性的比较。结果显示,重组突变体rRC-HL(01P-074M)、rRC-HL(074P-01M)与亲本弱毒株rRC-HL在BSR/T7-9细胞中生长趋势较为相似,但在24、48、96h的病毒滴度均低于亲本毒株;与亲本强毒株CX01、GX074及标准强毒株CVS-11比较,重组突变体病毒滴度明显增高,说明狂犬病毒P和M基因影响病毒的复制。