南方红豆杉叶绿体非编码序列PCR体系优化及引物筛选

摘要

PCR技术广泛用于分子标记、基因工程等领域,是植物系统发育及种群遗传结构等研究的基础.通过对影响PCR体系扩增的主要因子进行单因素试验,得出南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)叶绿体DNA(cpDNA)最优体系(30μL)为3μL 10×PCR buffer,1μL DNA模板(60 ng),4.2μL MgCl2 (3.5 mM),8.4μL dNTPs (0.7 mM),0.9μL引物(0.3μL),0.8μLTaq DNA聚合酶(2 U),10.8 μL去离子水.利用该体系筛选出叶绿体DNA非编码区通用引物4对,分别为atpI-atpH、psbJ-petA、trnH-psbA和trnL-trnF.