小反刍兽疫病毒、A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

摘要

小反刍兽疫病毒(PPRV)是一种感染小反刍动物的急性接触性传染病,近年来在我国多个省份流行,对我国养羊业造成了巨大危害.口蹄疫病毒(FMDV)A型和O型疫情曾在我国多地暴发,今年仍零星发生.小反刍兽疫和口蹄疫均为A类传染病,也都是水疱性疾病,其临床症状极其相似.为建立一种检测并鉴别小反刍兽疫病毒和口蹄疫病毒的方法,针对小反刍兽疫病毒的F基因和口蹄疫的VP1基因,合成相应的引物,优化反应体系和扩增条件,建立一种同时检测小反刍兽疫病毒和A,O型口蹄疫病毒的方法.对建立的多重RT-PCR方法进行特异性和敏感性试验,结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法敏感性强,特异性良好,对小反刍兽疫病毒和A,O型口蹄疫病毒最低检出量分别为PPRV 102 copies/μL、A型FMDV 102 copies/μL、O型FMDV 10 copies/μL.本方法的建立对临床感染口蹄疫和小反刍兽疫病毒的家畜进行快速检测具有十分重要的意义.