蒜臭素和大蒜素可缓解促氧化剂诱导的猪上皮细胞氧化应激和脂多糖刺激的细胞免疫调节功能

摘要

本实验以小肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型,旨在评估是否蒜臭素(DADS)和大蒜素(DATS)可缓解氧化应激和内毒素应激。实验采用2×2×2因子设计,处理分别为0或18μM的DADS和DATS,0或100μM过氧化氢应激剂,0或10μg/mL内毒素应激剂(LPS),每个处理8个重复。细胞培养在含有DADS和DATS的培养基中18小时,LPS中6小时,过氧化氢中3小时。RT-PCR方法检测细胞因子白介素IL-8、肿瘤坏死因子TNF-α、紧密连接蛋白Claudin 1、occludin、ZO-1的基因表达量。测定跨上皮电阻值(TEER)、培养液上清中过氧化氢酶和IL-8蛋白的顶端分泌量。实验结果表明,LPS刺激可显著提高IPEC-J2中TNF-α和IL-8的基因表达量(P<0.01),而添加过氧化氢和DADS+DATS无显著差异。DADS+DATS有提高IPEC-J2中ZO-1基因表达量的趋势(P=0.08),DADS+DATS和过氧化氢处理没有影响TEER值,但LPS处理有降低TEER值的趋势(P=0.02)。过氧化氢处理显著降低了细胞过氧化氢酶活性(P<0.01),但DADS+DATS预孵会显著恢复其活性(P<0.01)。LPS处理显著提高IL-8的分泌(P<0.01),但DADS+DATS预孵其分泌量进一步增长(P<0.01)。基于当前研究结果得出,DADS+DATS处理能缓解过氧化氢引起的氧化应激,同时能改变LPS处理的IPEC-J2的IL-8分泌量。