氨基酸转运载体B0AT1(SLC6A19)新型抑制剂的鉴定,作为诱导蛋白质限制和治疗2型糖尿病的潜在目标

摘要

中性氨基酸转运载体B0AT1最近被确定为是治疗2型糖尿病及相关代谢失调的靶点。B0AT1介导所有钠依赖性中性氨基酸的摄取。B0AT1需要collectrin(TMEM27)的共表达来在表层表达并发挥催化活性。本研究旨在建立鉴定和评估新型B0AT1的抑制剂的方法。CHO细胞系可稳定表达collectrin和B0AT1。利用高通量筛选以及荧光探针手段检测B0AT1摄取氨基酸期间细胞膜的去极化情况。在进行功能分析的同时,基于与B0AT1高度同源的果蝇多巴胺转运载体的高分辨率结构,使用AutoDock4对计算机模拟化合物进行筛选。我们测定了一系列新型B0AT1转运蛋白抑制剂。Benztropine是转运蛋白的竞争性抑制剂,其IC 50为44±9μmol。该化合物对相关转运体具有选择性,并阻断了小鼠小肠翻转模型中中性氨基酸摄取。本研究建立的方法可以广泛用于鉴定新的转运抑制剂。利用该方法能够可研究上皮转运、诱导蛋白质限制或通过药物化学进一步开发化合物。