柱花草炭疽菌突变体库致病缺陷转化子筛选及T-DNA插入位点侧翼序列分析

摘要

比较了接种病原菌侵染柱花草的几种方法的效果,选定出最佳的初筛和复筛方法,进而对1 230个转化子进行筛选,得到致病力缺陷菌23株,其中致病力减弱的菌株18株,致病力完全丧失的5株.利用TAIL-PCR扩增致病力丧失突变子t-2430的T-DNA插入位点侧翼序列,得到大小为476 bp的一段序列,BLAST比对已测序炭疽菌基因组,发现401nt和数据库的Contig464的部分序列完全一致,进一步对该段序列的功能进行预测,表明T-DNA插入在一预测基因的启动子区域,并且这个预测基因与稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的天冬氨酸转氨酶(XP_003719674.1)同源性为79％.