N-3多不饱和脂肪酸对脂多糖诱导的心肌细胞损伤的保护作用及机制的初步研究

摘要

目的 观察N-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acid,N-3 PUFA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)损伤心肌细胞Toll样受体2/4(toll like receptor 2/4,TLR2/4)表达的影响,并初步探讨作用机制.方法 采用LPS诱导心肌细胞损伤(H9C2-1000),分别给予N-3 PUFA预处理(H9C2-N1000)、TLR2 (H9C2-N1000-T2)、TLR4(H9C2-N1000-T4)单独阻断剂或联合阻断剂(H9C2-N1000-T24)干预;收集各组培养细胞,qPCR检测TLR2、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达;Western blot检测TLR2、TLR4、NF-κB蛋白表达;ELISA法检测主要炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达.结果 N-3PUFA处理组心肌细胞TLR2、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达下调(与LPS诱导心肌细胞损伤组相比,P均＜0.05).经TLR2阻断剂单独和TLR2/4阻断剂联合处理后,NF-κB、IL-lβ和TNF-α mRNA表达明显增高,而与之相反的是TLR4阻断剂单独处理组细胞上述指标无明显变化.与LPS诱导心肌细胞组相比,N-3PUFA组TLR2、TLR4、NF-κB、IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显降低;经TLR2单独阻断和TLR2/4联合阻断剂干预后,NF-κB、IL-1β及TNF-α水平与N-3PUFA组相比明显增加(P均＜0.05),而TLR4单独阻断组NF-κB、IL-1β及TNF-α水平与N-3PUFA组相当.结论 N-3PUFA能减轻LPS诱导心肌细胞损伤,其主要机制可能为抑制TLR2-NF-κB信号通路,降低炎性细胞因子IL-1β及TNF-α水平.