抑制肝癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ表达导致细胞未折叠蛋白质反应

摘要

目的探讨N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-Ⅴ)对细胞基因表达和功能的影响.方法用Western Blot验证GnT-Ⅴ的反义cDNA稳转的细胞株AsGnT-Ⅴ7721(AsGnT-Ⅴ SMMC 7721)中GnT-Ⅴ表达,用基因芯片技术比较AsGnT-Ⅴ7721与7721(SMMC-7721)细胞的基因表达差异,同时用RT-PCR和Western Bolt检测AsGnT-Ⅴ 7721细胞中未折叠蛋白质反应信号通路关键分子Bip和XBP1的表达变化.结果基因芯片检测到的AsGnT-Ⅴ7721细胞中的基因表达变化表明,细胞中产生未折叠蛋白质反应.同时AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号途径中的关键分子Bip的mRNA和蛋白表达升高,XBP1 mRNA被剪接.结论GnT-Ⅴ表达受阻能导致细胞产生未折叠蛋白质反应.