盐生海芦笋内生真菌Salicorn 35的分离鉴定与抗氧化发酵条件优化

摘要

采用分子生物学与形态学观察相结合的方法,鉴定分离自盐生海芦笋中的内生真菌Salicorn 35.提取基因组DNA后分别对其18S rDNA和ITS1-5.8S-ITS4区域进行PCR扩增并进行单克隆测序分析.将序列提交NCBI进行核酸序列同源性比较,利用MEGA5.0软件对序列进行分析,构建系统发育树.结合形态学与显微镜观察将该菌鉴定为茄病镰刀菌(Fusarium solani).在此基础上,以抗氧化活性为指标,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应曲面法对Salicorn 35菌株的发酵条件进行优化,最大限度地提高其抗氧化活性.优化后的最佳培养基配方为(质量分数):酵母膏1.5％、蛋白胨2.7％、土豆40％、麦芽糖3％、甘露醇1％、葡萄糖1.5％、味精1.0％、氯化钠6.0％,pH5；采用此培养基所得发酵产物对DPPH自由基的清除率为76.75％,比优化前(清除率57.77％)有显著提高.