双歧杆菌RH胞外多糖提取纯化及体外抗凝血活性评价

摘要

为得到高纯度双歧杆菌RH胞外多糖,并探讨其抗凝血功效,采用正交试验优化酶解提取工艺.优化最佳酶解条件为:蛋白酶添加量2g/L,中性蛋白酶与胰蛋白酶质量比例为1∶2,在pH 7.5的条件下酶解120m in.再经凝胶Sepharose CL-6B柱层析纯化,得到胞外多糖纯品.利用凝胶色谱结合多角度激光散射仪测得该胞外多糖分子质量为5.946×104D.进一步对其抗凝血活性进行评价,不同质量浓度胞外多糖可以显著延长活化部分凝血活酶时间和凝血酶时间,且具有剂量依赖效应.纯化后胞外多糖纯度可以达到97％以上,纯多糖具有较好的体外抗凝血活性,主要参与内源凝血途径.