绿豆总RNA的分离及环氧水解酶基因的克隆

摘要

cqvip:目的研究分离绿豆总RNA的方法,并从中克隆环氧水解酶基因。方法采用UNIQ-10柱式法、Trizol法和改良Trizol法等3种方法分离绿豆种子、胚芽和豆芽总RNA,鉴定RNA的产率、纯度及完整性,根据环氧水解酶的保守序列扩增绿豆环氧水解酶基因。结果 UNIQ-10柱式法分离的RNA降解,Trizol法获得的RNA有杂质污染,改良Trizol法得到的RNA产率、纯度及完整性最好;RT-PCR后仅从绿豆胚芽中成功扩增到环氧水解酶基因保守序列。结论改良Trizol法简便易行,能有效地去除多糖、多酚等次生物质的干扰,最适于绿豆胚芽总RNA的分离。