SIRT1对氧化应激下人小梁网细胞功能的影响

摘要

目的:通过在人小梁网细胞(human trabecular meshwork cell,HTMC)中过表达沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 1,SIRT1),探讨SIRT1对氧化应激下HTMC功能的影响。方法:将SIRT1过表达慢病毒和GFP阴性对照慢病毒按照最佳(multiplicity of infection,MOI)分别转染入HTMC,并用实时定量PCR法对SIRT1是否在细胞中过表达进行验证。实验分为以下4组:正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE(过表达)组、H2O2+Lv-GFP组,分别采用Transwell法和CCK8法检测氧化应激下HTMC的迁移能力和活性。两组间比较采用独立样本t检验。结果:在正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE组、H2O2+Lv-GFP组这4组中,Transwell实验结果分别为436±73、254±25、510±51、327±46,H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组差异均有统计学意义(P<0.01)。CCK8法结果显示,H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和阴性对照组(H2O2+Lv-GFP)相比,Bax表达水平明显下降,Bcl-2表达水平明显提高,差异均有统计学意义(P<0.01)。ROS活性氧测定显示H2O2+Lv-SIRT1-OE组比H2O2组的细胞活性氧水平显著降低(P<0.05)。结论:在HTMC中过表达SIRT1能有效降低氧化应激对HTMC迁移能力和活性的影响,从而对HTMC起到一定的保护作用,为后续研究SIRT1保护氧化应激下HTMC的调控机制打下基础。