新型罗丹明类荧光标记探针的研究(Ⅱ)—罗丹明B-N-羟基琥珀酰亚胺酯的合成与标记应用

摘要

Rhodamine B(R)在乙腈介质中加入N-羟基琥珀酰亚胺和二环己基碳二亚胺,在45℃时反应1小时,常温下搅拌20小时制得标题化合物(BR-SE),用H-NMR、IR进行了表征.选择甘氨酸进行标记得到产物乙氨酸Rhodamine B酰胺(RB-Gly);RB、RB-SE、RB-Gly的最大可见吸收分别为545nm、558nm、556nm;在HPLC的分离中(流动相:甲醇:水:醋酸=70:29.4:0.6;检测波长560nm),最大吸收波长不受色谱条件影响,其保留时间分别为1.811min(RB-Gly)、2.198min(RB-SE)、3.070min(BR);RB-SE的浓度、缓冲液pH、标记反应温度对标记效率有影响.