蒙花苷通过调节NLRP3炎症小体改善实验性干眼模型的先天免疫炎性反应

摘要

目的通过蒙花苷(LA)对实验性干眼模型的干预,探讨LA对干眼的治疗效果和作用机制。方法通过建立干眼人角膜上皮细胞干眼高渗模型和动物干眼模型,采用LA进行干预,用CCK-8实验评估LA对人角膜上皮细胞的毒性反应;对实验小鼠采用酚红棉线进行泪液量测量,采用0.1%荧光素钠染色条进行泪膜破裂时间的测定,采用俄勒冈绿(OGD)荧光染色检测角膜上皮的渗透功能;通过碘酸-希夫(PAS)染色对动物模型的结膜杯状细胞数量进行评估;通过原位末端转移酶标记技术(TUNEL)实验对LA对两种模型的细胞凋亡进行评估;通过免疫荧光染色对细胞模型的Ki-67、动物模型的MMP-3和MMP-9进行评估;采用RT-qPCR和Western blot对动物模型的NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TNF-α进行评估。结果LA对人角膜上皮细胞无毒性反应,并在细胞高渗干眼模型下,LA能提高细胞的增殖反应,降低细胞的凋亡;LA能增加泪液分泌量和泪膜破裂时间、减少角膜OGD染色、增加结膜杯状细胞数量;LA能降低角结膜的MMP-3、MMP-9和TNF-α的表达,减少角膜上皮凋亡;LA能抑制动物干眼模型结膜的NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达。结论LA能安全、有效地通过改善干眼眼表屏障功能损伤、抑制眼表NLRP3炎症小体治疗干眼。