免疫测定光敏核不育水稻中光敏色素Ⅰ含量

摘要

光敏核不育水稻（农垦５８Ｓ）是中国水稻研究中的一个重要发现，在水稻杂交育种上有巨大潜力。研究表明：农垦５８Ｓ的雄性不育性受光周期调控，光敏色素是育性转变过程中光周期反应的光受体，然而，鉴于高等植物中存在至少两种不同的光敏色素分子，并且它们同时存在于水稻中，人们对调节农垦５８Ｓ雄性不育过程的光敏色素分子种类及作用方式仍然不清楚。本文采用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ），比较了不同光周期下农垦５８Ｓ和对照品种农垦５８叶片（光周期感受器官）中光敏色素Ｉ（ｐｈｙＡ）的含量。从农垦５８Ｓ的二次枝梗原基分化期开始，进行１０天的光周期处理。一组为短日照（ＳＤ），另一组为长日照（ＬＤ）。在第１０个暗期结束前，于暗绿光下收获每株水稻的最上部两片新展叶，立即保存在液氮中。样品在研钵中磨成液氮粉，然后加入提取液（含５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣＩ和０．２ｍｏｌ／Ｌ巯基乙醇，ｐＨ８．５）匀浆。粗提液经０．５％聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）沉淀后，上清液供ＥＬＩＳＡ分析。以燕麦ｐｈｙＡ的多克隆抗体、单克隆抗体分别作ＥＬＩＳＡ的一抗和检测抗体。采用ＥＬＩＳＡ可以专一性地检测水稻ｐｈｙＡ（Ｔａｂｌｅ１）。几次独立的实验说明，光周期处理对ｐｈｙＡ含?