硒化修饰提高大蒜多糖体外抗新城疫病毒活性的研究

摘要

旨在研究硒化修饰提高大蒜多糖的体外抗新城疫病毒(NDV)活性并筛选出体外抗NDV活性较好的硒化大蒜多糖。依次通过水提醇沉法、Sevage法去蛋白得到大蒜多糖(GPS),并采用硝酸-亚硒酸钠法对大蒜多糖进行硒化修饰,得到9个硒化大蒜多糖sGPS_(1)~sGPS_(9)。以鸡胚成纤维细胞(CEF)为作用对象,采用MTT法通过先加硒化大蒜多糖,或先加NDV,或两者同时加入3种方式比较9个硒化大蒜多糖抗NDV侵入、复制、直接抑制NDV的作用,同时设置细胞对照(CC)和病毒对照(VC),并计算病毒抑制率;筛选出活性较好的sGPS_(3)、sGPS_(5)、sGPS_(6)测定其对NDV感染CEF后细胞凋亡、细胞周期的影响以及其对鸡胚的存活数的影响,同时设置GPS对照、VC对照、空白对照(BC)。结果表明,GPS_(5)、sGPS_(6)组的细胞凋亡率、处于S期的细胞百分数显著低于VC组和GPS组(P<0.05);sGPS_(6)组36 h、48 h的细胞凋亡率显著小于sGPS_(3)、GPS_(5)组(P<0.05),处于S期的细胞百分数小于sGPS_(3)、sGPS_(5)组,sGPS_(3)组在36 h、sGPS_(5)组在24 h和36 h、sGPS_(6)组在3个时间点的鸡胚死亡数均显著小于GPS组(P<0.05),sGPS_(6)组在3个时间点的鸡胚死亡数均为最低。综上,硒化修饰能提高大蒜多糖抗NDV的活性,其机制可能与阻止NDV侵入、抑制NDV诱导CEF凋亡有关。其中sGPS_(6)的活性最强,可作为抗NDV的候选药。