黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡与自噬相互作用的影响

摘要

为探究黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡与自噬相互作用的影响,本试验利用DAPI、Hoechst、MDC染色、流式细胞术、RT-qPCR、Western Blot等方法分别检测黑枸杞花青素结合自噬抑制剂3-MA对RAW264.7细胞核形态、凋亡率、凋亡因子mRNA、JNK信号通路因子mRNA及蛋白表达的影响;黑枸杞花青素结合JNK抑制剂SP600125对RAW264.7自噬体、自噬因子mRNA及蛋白表达的影响。结果表明:黑枸杞花青素结合3-MA后RAW264.7未发现明显凋亡形态,但细胞数量增多,凋亡率显著降低(P<0.05),Caspase-3、Bax的mRNA表达显著降低(P<0.05),Bcl-2的mRNA表达显著升高(P<0.05),Bax/Bcl-2的mRNA表达显著降低(P<0.05),JNK信号通路因子JNK的mRNA表达及p-JNK的蛋白表达显著降低(P<0.05);黑枸杞花青素结合SP600125后RAW264.7无自噬体聚集现象,LC3-Ⅱ的mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),Beclin-1的mRNA表达显著降低(P<0.05)。黑枸杞花青素结合3-MA能抑制RAW264.7的细胞凋亡,结合SP600125能抑制RAW264.7的细胞自噬,可通过JNK信号通路对RAW264.7细胞凋亡与细胞自噬的相互关系进行调控,发挥对RAW264.7的保护作用,提高小鼠免疫力。