lncRNA H19通过DNMT1下调PTEN参与膀胱癌的增殖与迁移

摘要

目的探讨H19通过调控抑癌基因PTEN的表达在膀胱癌增殖与迁移中的作用及分子机制。方法采用蛋白免疫印迹和qRT-PCR评估膀胱癌细胞和组织中H19的表达水平。H19对膀胱癌细胞增殖和迁移能力的调控作用分别通过CCK-8实验、克隆形成实验和Transwell实验评估。采用RNA免疫沉淀法和染色质免疫沉淀法证实H19和DNMT1的直接关联及DNMT1在PTEN中的调控机制,MSP实验检测甲基化水平,最终实施挽救实验以阐明H19是否通过抑制PTEN表达介导了膀胱癌细胞的细胞行为。结果qRT-PCR结果显示,H19在膀胱癌组织中的表达较癌旁组织明显增高,同时H19的表达量在晚期膀胱癌组织中明显高于早期膀胱癌。在膀胱癌细胞系中抑制H19的表达能够抑制细胞增殖与迁移。RIP及CHIP实验结果显示,H19通过向PTEN启动子募集DNMT1促进了PTEN启动子的甲基化作用,进一步挽救实验表明抑制PTEN可以部分逆转下调H19导致的细胞增殖及迁移变化。结论H19的高表达通过DNMT1下调PTEN的表达促进了膀胱癌细胞的增殖和迁移潜能。