5-杂氮-2'-脱氧胞苷调控UCHL1基因表达对人前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响

摘要

目的:探讨5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人前列腺癌细胞(PC-3)株增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法以2.5、5.0、10.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于PC-3细胞48h后,采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测UCHL1 mRNA表达;甲基化测序聚合酶链反应(BSP)检测UCHL1 CpG岛的甲基化状态;蛋白质印迹法(Western Blot)检测UCHL1蛋白的表达。结果:5-Aza-CdR对PC-3细胞生长有抑制作用;与对照组相比细胞凋亡率明显增高(P<0.01);5-Aza-CdR处理细胞后UCHL1的启动子甲基化水平明显降低(P<0.01);UCHL1 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);UCHL1蛋白表达水平上升(P<0.01)。结论:5-Aza-CdR能诱导前列腺癌PC-3细胞株凋亡的作用,其机制可能是5-Aza-CdR能逆转PC-3细胞UCHL1启动子CpG岛的异常甲基化,诱导mRNA转录和蛋白的表达。