鲍曼不动杆菌CRISPR相关蛋白Csy1对耐药性和毒力的影响

摘要

采用RecAb同源重组系统,将携带I-Fb亚型CRISPR-Cas系统的鲍曼不动杆菌临床分离株AB43的csy1基因敲除,观察野生株(AB43)和缺失株(AB43Δcsy1)的耐药性、生物膜形成以及小鼠致死率等生物学性状变化,并通过转录组测序分析两者间的差异表达基因。与野生株相比,csy1的缺失显著提高突变株的耐药水平和体外形成生物膜的能力,且AB43Δcsy1感染组小鼠的存活率与AB43感染组相比显著降低,提示其毒力有所提高。RNA-seq分析结果显示,csy1的缺失能影响细菌与抗生素耐药性、毒力以及代谢相关基因的表达,推测是引起AB43Δcsy1表型变化的主要原因。结果提示Csy1蛋白可通过调节自身基因表达抑制鲍曼不动杆菌的耐药性、生物膜形成及致病性。这说明创造有利于维持CRISPR-Cas系统的环境,保证CRISPR-Cas系统阳性菌株处于进化优势地位,使鲍曼不动杆菌保持低毒力和抗生素敏感状态。