人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

摘要

Na^+/H^+交换泵(Na^+/H^+ exchanger,NHE)基因家族有5个亚型,分别命名为NHE-1,2,3,4及β-NHE,其中NHE-l是一种管家基因.NHE-l能通过Na^+/H^+交换,将胞内H^+排出,是维持胞内pH在中性或偏碱性(pH= 7.0～7.2)的一种重要膜蛋白.肿瘤细胞由于其糖酵解的反巴士德效应,导致酸性产物的异常增加,但肿瘤细胞能依靠表达增强的NHE-1膜蛋白,将胞内H^+泵出胞外,阻止癌细胞酸化.而目前已证明胞内H^+的蓄积将会诱发细胞凋亡.因此,抑制人肺癌细胞NHE-1基因上调表达将诱发细胞酸化和凋亡,达到肿瘤治疗的目的.为将来在有机整体中实施NHE-1基因抑制的肿瘤治疗奠定基础,我们从人肺癌组织细胞中克隆了NHE-1基因cDNA的部分序列。