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高分辨率熔解曲线法检测广州管圆线虫幼虫的初步研究

         

摘要

目的 利用实时荧光PCR及高分辨率熔解曲线法检测广州管圆线虫Ⅲ期幼虫。 方法 针对广州管圆线虫核糖体RNA基因的内转录间隔区(ITS)序列设计引物,应用实时荧光PCR和高分辨率熔解曲线法检测广州管圆线虫Ⅲ期幼虫。并通过检测广州管圆线虫、华支睾吸虫和棘颚口线虫DNA,分析该方法的特异性;分别检测1~10条广州管圆线虫Ⅲ期幼虫DNA,分析该方法的敏感性。 结果 该方法能够特异性检测广州管圆线虫幼虫,检测华支睾吸虫和棘颚口线虫时未出现扩增曲线和熔解曲线峰。检测灵敏度可达到1条幼虫。 结论 实时荧光PCR及高分辨率熔解曲线法检测广州管圆线虫幼虫具有较好的特异性和敏感性。

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