睾酮通过SDF-1α/CXCR4轴调控骨髓内皮祖细胞迁移

摘要

目的探讨雄激素睾酮对小鼠骨髓源性内皮祖细胞(BM-EPC)迁移功能的影响及其机制。方法 6周龄雄性BALB/C小鼠,切除双侧睾丸,饲养4周,培养、鉴定BM-EPC。收集贴壁细胞随机分为8组:分别添加0、1、10、100 nmol/L睾酮以及相应浓度睾酮加氟他胺(雄激素受体阻断剂)预处理。Transwell实验检测各组BM-EPC经或未经趋化因子受体4(CXCR4)抑制剂AMD3100处理后向基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的迁移。逆转录聚合酶链反应和Western blot检测各组BM-EPC CXCR4的表达。Transwell实验检测BM-EPC的迁移。结果与对照组相比,睾酮呈浓度依赖性促进BM-EPC向SDF-1α迁移(放大200倍视野下,A组:61.80±9.31;B组:83.20±6.53;C组:107.00±12.85;D组:134.80±8.64;P<0.05)。与对照组相比,睾酮呈浓度依赖性促进BM-EPC CXCR4 mRNA的表达(CXCR4 mRNA的相对表达量:A组:0.065±0.005;B组:0.114±0.002;C组:0.149±0.019;D组:0.209±0.013;P<0.05)。睾酮呈浓度依赖性促进BM-EPC CXCR4蛋白的表达(CXCR4与Actin表达量之比:A组:0.23±0.06;B组:0.40±0.02;C组:0.62±0.04;D组:0.77±0.05;P<0.05),但此作用被雄激素受体阻断剂氟他胺阻断。AMD3100阻断了不同浓度睾酮对BM-EPC的迁移作用。结论睾酮通过雄激素受体途径作用于SDF-1α/CXCR4轴,上调BM-EPC CXCR4的表达而增强其迁移功能。