经黄胫小车蝗增殖的亚洲小车蝗痘病毒DNA和结构蛋白的特性

摘要

从内蒙古亚洲小车蝗（Ｏｅｄａｌｅｕｓａｓｉａｔｉｃｕｓ）上分离亚洲小车蝗痘病毒（ＯｅｄａｌｅｕｓａｓｉａｔｉｃｕｓＥｎｔｏｍｏｐｏｘｖｉｒｕｓ，ＯｅａＥＰＶ），经口接种黄胫小车蝗（Ｏｅｄａｌｅｕｓｉｎｆｅｒｎａｌｉｓ）以繁殖病毒，并获得纯化的病毒包涵体。纯化的病毒包涵体经碱解、酚抽提，得到ＯｅａＥＰＶＤＮＡ。经紫外分光光度计测定，该ＤＮＡ具有典型的核酸紫外吸收光谱。根据热变性曲线测得ＯｅａＥＰＶ－ＤＮＡ的Ｔｍ值为７７．０℃，Ｇ＋Ｃ％为１７．８％，增色效应明显。该ＤＮＡ经限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＢｇｌⅡ和ＨｉｎｄⅢ酶切后，分别得到１５、１６和８个片段，用片段积加法求得的分子量相似，平均为１２２．７×１０￣６道尔顿。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，ＯｅａＥＰＶ粒子的结构蛋白至少有４６种多肽，有５种含量较高。经８ｍｏｌ／Ｌ尿素裂解，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，ＯｅａＥＰＶ包涵体蛋白主要由一种多肽组成，其分子量约为１０００００道尔顿。包涵体蛋白富含天冬氨酸和亮氨酸。