鸡培养细胞γ-干扰素诱生条件的优化

摘要

目的:探讨鸡γ-干扰素(IFN-γ)的最佳诱生条件。方法:采用夹心ELISA对培养的不同种类细胞在不同诱生剂作用下IFN-γ的分泌水平进行了检测,并对影响IFN-γ产量的条件进行了优化。结果:在ConA、PHA、ARV三种诱生剂中,ARV诱生能力最强,ConA其次,PHA最弱;其最佳诱生剂量分别为:ARV105TCID50/mL,ConA30μg/mL,PHA1.5μg/mL。鸡脾淋巴细胞、外周血白细胞(PBL)和鸡胚成纤维细胞(CEF)在同种诱生剂作用下,脾淋巴细胞IFN-γ分泌量最高,为47.65±3.26pg/mL。各种细胞最佳浓度均为3.0×106/mL。脾淋巴细胞在ConA和PHA刺激下,培养60h时产生的IFN-γ最高;而ARV诱导48hIFN-γ即可达峰值。同种IFN-γ具有启动效应。结论:确定了鸡IFN-γ的最佳诱生条件,为鸡IFN-γ定量检测奠定了基础。