电击法玉米转基因技术

摘要

本文介绍了电击法转化玉米原生质体的原理、方法及转基因玉米鉴定的方法等。在离体条件下，将欲转入的靶基因与载体质粒重组构建重组ＤＮＡ分子，同时，用去壁液处理玉米未成熟胚的悬浮细胞制备原生质体。将２０～４０μｇ的超螺旋重组ＤＮＡ分子与１５～３×１０６个玉米原生质体细胞混匀后，置于强电场环境中，用５００～７５０Ｖ／ｃｍ的高电压处理５ｍｉｎ，使原生质体的细胞膜通透性增强，并使重组分子进入到受体细胞内。在选择培养基中，选择已转入并稳定表达外源基因的转化细胞，再经组织培养形成愈伤组织，并再生成转基因玉米植株，最后用适当的方法对再生植株进行鉴定。