沙眼衣原体临床分离株药物敏感性测定及耐药基因检测

摘要

目的检测本地区泌尿生殖道沙眼衣原体(CT)对四环素类、大环内酯类、喹诺酮类抗生素的体外药物敏感性,并从基因水平上探讨其耐药机制。方法将42株经细胞培养法证实有CT感染的临床株进行McCoy细胞培养,传代至感染率达90%以上,收集标本进行药敏试验。分别检测四环素耐药质粒tetM基因;大环内酯类耐药相关的23S核蛋白体RNA基因、核糖体蛋白基因L4,通过产物测序检测基因突变;限制性片段分析(RFLP)检测gyrA喹诺酮耐药决定区(QRDR)常见的基因点突变。结果药敏MIC(单位均为μg/mL)分别为红霉素0.5～2.0,克拉霉素0.008～0.032,阿奇霉素0.125～0.50,四环素0.157～0.625,多西环素0.063～0.125,米诺环素0.032～0.128,左氧氟沙星0.50～1.00,莫西沙星0.060～0.120,司帕沙星0.064～0.128,其中发现2株红霉素耐药株(MIC值2μg/mL),其23srRNA基因有C2452A,T2611C的突变(大肠杆菌序列编号),红霉素耐药株及敏感株L4基因均发现脯氨酸113(CCG)→亮氨酸(CTG)、脯氨酸156(CCC)→丙氨酸(GCC)两个位点的突变(GenBankNC000117.1),25株临床分离株中检测到tetM基因,未发现gyrA-QRDR基因中Ser83→Ile点突变。结论发现2株红霉素耐药株,未发现其它八种抗菌药的耐药株。克拉霉素显示了较高的体外抗CT活性。C2452A,T2611C的突变导致红霉素低水平耐药,L4基因的点突变可能与红霉素耐药无关。