溴结构域蛋白4抑制剂JQ1对肝癌细胞活性的影响

摘要

目的:探讨溴结构域蛋白4(bromodomaincontaining protein 4,BRD4)抑制剂JQ1对两种不同肝癌细胞系增殖、凋亡的影响.方法:用B R D4抑制剂J Q1处理H e p G2,Bel-7402细胞株,磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)染色检测细胞活力;Ed U(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)嵌入和Hoechst 33342染色法检测细胞增殖;以流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双染法分别分析细胞周期、细胞凋亡;最后用Western blot法观察JQ1介导抗增殖作用主要下调蛋白C-myc在蛋白水平上的变化,进一步验证JQ1抑制肝癌细胞增殖的作用.同时探讨JQ1与目前肝癌细胞治疗药物甲苯磺酸索拉非尼片对肝癌细胞的比较和联合作用.结果:BRD4抑制剂JQ1可以以剂量依赖的方式显著抑制HCC细胞系:Hep G2细胞和B e l-7402细胞的活力,具体表现为:抑制其细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染法分析发现能促进其凋亡;同时C-myc蛋白表达的也被显著抑制.与JQ1、索拉非尼片单药应用相比,小剂量的JQ1与索拉非尼片联合应用,HCC细胞的生长抑制率增加,凋亡率也增加,提示BRD4抑制剂JQ1联合索拉非尼片对细胞生长的抑制作用要强于JQ1或索拉非尼片单独用药.结论:BRD4抑制剂JQ1可能是一种潜在的可治疗肝细胞癌的新型药物.