转化生长因子β基因转染抑制环孢素A肾毒性细胞凋亡的机制探讨

摘要

目的探讨转化生长因子βⅡ型受体免疫球蛋白(Ig)G重链Fc段(TGFβRⅡ/IgG Fc)嵌合蛋白基因转染改善小鼠环孢素A(CsA)肾毒性细胞凋亡的作用。方法雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠予低钠饮食,CsA组和干预组每日皮下注射CsA。在给药的第1天和第7天,CsA组在胫骨肌处注射携带lacZ基因的质粒(pCAGGS-lacZ),干预组注射pCAGGS-TGFβRⅡ/IgGFc,给药2或3周后处死。血浆和肾组织中转化生长因子(TGF)-β1蛋白水平由酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学法测得,肾组织中TGF-β1 mRNA水平用Northern印迹法测定。利用过碘酸雪夫反应(PAS)和Masson三色染色半定量评分评估肾小管损害和肾间质纤维化程度。采用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术(TUNEL法)检测肾小管间质细胞凋亡。结果CsA给药2周后,血浆、肾脏TGF-β1表达及其mRNA水平均达到最高,显著高于对照组(P值分别0.05);小管间质病变持续减轻,PAS染色半定量评分和Masson套染计算肾皮质胶原容积显著低于CsA3周组(P值均<0.01);小管间质凋亡细胞百分比显著低于CsA3周组(P<0.01)。小管间质损伤程度和间质纤维化程度均与凋亡细胞百分比呈正相关(r=0.804、0.906,P值均<0.01)。结论TGFβRⅡ/IgG Fc基因转染有效抑制了CsA引起的小管间质病变。细胞过度凋亡参与了慢性CsA肾病的发病,且与小管间质损伤及纤维化程度密切相关。TGF-β1在这一过程中发挥了重要作用,TGFβRⅡ/IgG Fc的干预治疗可有效抑制上述改变。