诱导型一氧化氮合酶基因启动子-969G→C多态性的功能

摘要

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因启动子-969G→C多态性的功能意义. 方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增已知的iNOS基因启动子-969G→C多态性的GC和GG基因型启动子DNA序列, 再采用基因重组技术将获得的启动子与PGVB-2-E荧光素酶载体质粒连接,构建新的重组质粒pPGV-iNOSmt和pPGV-iNOSwt,并进行酶切图谱分析和测序分析.然后将重组质粒分别在脂质体的介导下转染HepG2细胞,检测荧光素酶的表达水平,分析不同基因型启动子的活性差异. 结果:成功构建iNOS基因-969G→C多态性的GC和CK; 基因型启动子荧光素酶载体重组质粒pPGV-iNOSmt和pPGV-iNOSwt,发现iNOSmt启动子的活性比对照启动子的活性显著升高,升高132.1%,差异有显著性(P0.05).iNOSmt启动子活性升高的百分率是iNOSwt启动子的9倍. 结论:iNOS基因启动子-969G→C的多态性改变导致该启动子的活性增强.