家蚕核多角体病毒P10基因启动子结构与功能分析

摘要

前文曾报导过家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）Ｐ１０结构基因和启动子全顺序￣［１］。经突变法消除起始码ＡＴＧ，并分离上游－２３０位－＋１位含完整启动子片段，在此Ｐ１０启动子片段后拼接报导基因（昆虫荧光素酶基因，Ｌｕｃ，Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）构建成表达质粒ｐＢｍｐ１０－Ｌｕｃ。质粒ｐＢｍｐ１０－ＬｕｃＤＮＡ转染有野生型ＢｍＮＰＶ感染的家蚕Ｂｍ－Ｎ细胞可测出Ｌｕｃ基因的瞬时表达。由启动子５’端（－２３０位）向Ｌｕｃ基因节律缺失删节，获得缺失至－１３５、－１１１、－３８位的各质粒（ｐＢｍｐ１０－１３５Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－１１１Ｌｕｃ、ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ）。功能检测证实除ｐＢｍｐ１０－３８Ｌｕｃ外，其它质粒都有Ｌｕｃ基因瞬时表达，说明－３８－－１１１位结构顺序是Ｐ１０启动子功能所必须的。在苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ）感染的ＢｍＮＰＶ非敏感细胞Ｓｆ－９中也得到相同的结果，说明ＢｍＮＰＶＰ１０启动子和ＡｃＭＮＰＶＰ１０启动子的调节因子可能是相似的。