siRNA沉默PAR1基因表达对大肠癌细胞侵袭力的影响

摘要

目的:研究RNA干扰活性蛋白酶受体(Protease-activated receptors,PAR1)表达以及对人类大肠癌细胞侵袭力的影响。方法:体外化学合成PAR1基因序列特异性双链RNA(dsRNA),在脂质体(Lipid)的介导下转染入人大肠癌Lovo细胞株,荧光倒置显微镜下观察转染效率,应用RT-PCR和Western blot检测PAR1mRNA和蛋白表达,体外实验测定肿瘤细胞穿透matrigel的能力。结果:干扰片段转染组的转染Pgenesil-1-PAR1-siRNA后大肠癌Lovo细胞株的PAR1基因和蛋白的表达被PAR1-siRNA有效沉默,与阴性对照组、空白质粒转染组相比PAR1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。转染48h后测定大肠癌Lovo细胞的侵袭力明显降低(P<0.01)。结论:PAR1-siRNA能有效抑制人大肠癌细胞株PAR1基因和蛋白的表达,降低人大肠癌细胞的侵袭力。