基于2,4-二硝基氟苯标记氨基酸的高效液相色谱法测定脂肽含量

摘要

本文将提取的一种脂肽(表面活性素)水解成其组成的氨基酸,以2,4-二硝基氟苯标记产生的氨基酸后,用高效液相色谱(HPLC)分离标记的目标氨基酸(亮氨酸),记录色谱图,分析氨基酸的硝基苯标记物的积分面积与氨基酸的关系。结果表明,脂肽中的氨基酸与标记产物的积分面积有很好的线性关系(R^2>0.99),据此可以测定脂肽的含量。测定了样品中表面活性素的含量,其相对标准偏差为6.5%,样品回收率92.6%(n=5)。因大部分脂肽均含有一个或多个亮氨酸或异亮氨酸,所含氨基酸的种类和数量是一定的,故该方法还可以用于测定其它类别脂肽的含量。