辛伐他汀对高浓度葡萄糖诱导心肌细胞炎症反应的干预作用及机制研究

摘要

目的 (1)观察高浓度葡萄糖对心肌细胞的作用,探讨高浓度葡萄糖损伤心肌的可能机制;(2)观察辛伐他汀对高浓度葡萄糖刺激下心肌细胞炎症因子表达的影响,并探讨其可能机制。方法 (1)取SD乳鼠心肌细胞做原代培养。(2)阴性对照组(blank):培养基中不加任何刺激物,培养72小时。(3)阳性对照组(positive control):培养基中加入终浓度为25 mmol/L的高浓度葡萄糖刺激乳鼠心肌细胞,培养72小时。(4)甲羟戊酸对照组(MVA):培养基中加入终浓度为25 mmol/L的高浓度葡萄糖和终浓度为200 umol/L的甲羟戊酸,培养72小时。(5)辛伐他汀干预组(Sim):培养基内加入终浓度为25 mmol/L的高浓度葡萄糖,同时分为三组并分别加入浓度为10^(-5) mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-7)mol/L辛伐他汀培养72小时。(6)辛伐他汀+甲羟戊酸干预组(Sim+MVA):培养基中加入终浓度为25mmol/L的高浓度葡萄糖,终浓度为10-5 mol/L的辛伐他汀和终浓度为200 umol/L的甲羟戊酸,培养72小时。(7)收集各组心肌细胞培养基上清液,用ELISA法测各组TNF-α、ICAM-1、MCP-1的表达;收集各组心肌细胞,用MTT法测定心肌细胞活力,RT-PCR法测心肌细胞AT1RmRNA、AT2R mRNA表达。结果 (1)与空白对照组比较,阳性对照组、MVA组心肌细胞活力显著下降(P<0.01),TNF-α、ICAM-1、MCP-1表达均明显增加(P<0.01)。(2)与阳性对照组比较,辛伐他汀组心肌细胞活力明显提高(P<0.01),TNF-oα、ICAM-1、MCP-1表达明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;加入甲羟戊酸后(Sim+MVA组),上述指标与阳性对照组比较无统计学差异。(3)与阳性对照组比较,辛伐他汀组[Sim(10^(-5)mol/L)组和Sim(10^(-6)mol/L)组]心肌细胞AT1R mRNA表达显著降低(P<0.05),AT2R mRNA表达轻度增加(P<0.05)。(4)AT1RmRNA表达与TNF-α表达呈正相关(相关系数为0.701,P<0.01);AT1R mRNA/AT2R mRNA也与TNF-α表达呈正相关(相关系数为0.749,P<0.01)。结论 (1)高浓度葡萄糖刺激诱发心肌细胞炎症反应,损伤心肌细胞;(2)辛伐他汀减轻高浓度葡萄糖刺激诱发的心肌细胞损伤,这种作用与辛伐他汀抑制多种炎症因子的表达,即抗炎作用有关;(3)辛伐他汀在心肌细胞中的抗炎作用可能与其下调心肌细胞中AT1R表达、增加AT2R表达,使AT1R与AT2R比例趋于正常有关。