毛细管电泳-激光诱导荧光检测测定脑啡肽方法的建立及其应用

摘要

建立脑啡肽（ENK）柱前荧光素异硫氰酸盐（FITC）衍生化,毛细管区带电泳-激光诱导荧光检测（CZE-LIF）测定的方法,并对FITC衍生化的影响因素和毛细管电泳的分离条件进行优化。毛细管电泳的分离条件为：75μm（内径）×67 cm石英毛细管柱;60 mmol/L pH 9.4 Tris-硼砂缓冲液;电压350 kV/cm;柱温25℃;压力进样3 s;LIF检测,λex/λem为488/520nm。以脑啡肽（ENK）标准品的浓度和电泳峰面积建立标准工作曲线,得到回归方程A=0.494 66＋0.085 92c,线性范围是35.2-563.1 fmol/μL,（n=7）,r=0.998 5,检测限为1.6×10^-15mol/μL（S/N=3）。大鼠脑部微透析液样品中脑啡肽应用此方法测定含量为7.4×10^-15mol/μL。