纤维连接蛋白或精甘天冬氨酸肽促进兔支气管上皮细胞NO合成

摘要

为验证细胞外基质成分纤维连接蛋白 (fibronectin ,Fn)对气道上皮细胞具有调控作用 ,本文用硝酸还原酶法测定了原代培养的兔支气管上皮细胞 (bronchialepithelialcells,BEC)的一氧化氮 (nitricoxide ,NO)释放 ,并测定了细胞内一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthesase ,NOS)活性 ,观察纤维连接蛋白、精 甘 天冬氨酸肽 (Arg Gly Asppep tide ,RGD)处理的影响 ,设置臭氧攻击组为阳性对照。结果 :(1)臭氧攻击 2h后 ,NO释放增多 (P <0 0 1,n =7) ,Fn (15 μg/ml)也能增加NO释放 (P <0 0 1) ,并被钙调素抑制剂N (6 氨基己烷 ) 5 氯 1 萘酚 磺酰胺 (N (6 Amino hexyl) 5 chloro 1 naphthalene sulfonamide ,W7) (10 -5mol/L)所阻断 (P <0 0 1) ;(2 )Fn (5～ 2 0 μg/ml)及RGD (15～ 6 0μg/ml)均显示对NO释放量的剂量依赖性促进作用 (分别为r=0 85和r =0 89) ;(3)Fn (15 μg/ml)明显提高BEC的NOS活性 (P <0 0 1,n =7) ,此效应也能被W7阻断 (P <0 0 1)。Fn及RGD对NOS活性的上调有量 效关系 ,分别为r=0 93及r=0 90。结果提示 ,Fn及其特殊识别片段RGD肽与BEC整合素分子的结合 ,可上调细胞的NOS活性及NO释放 ,其效应发挥与钙调素途径有关。