RP-HPLC法测定维生素D_3制剂中的有关物质

摘要

建立维生素D3制剂中有关物质检查的反相HPLC方法。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈为流动相;柱温20℃;检测波长为265 nm;流速1.0 mL/min。建立的方法可以使维生素D3与相邻杂质有效分离。通过光热反应特性和LC-MS-DAD对相邻杂质进行了定性。维生素D3与其主要杂质前维生素D3、反式维生素D3和速甾醇D3互为同分异构体,在LC-MS上具有相同的特征离子峰m/z 385.27,四者的最大紫外吸收波长分别为265,265,275,279 nm。该法专属性、耐用性较好,检测限和定量限分别为0.1μg/mL和0.3μg/mL。供试品溶液在室温下放置24 h稳定。应用本法对3种维生素D3制剂进行有关物质检查,并与正相HPLC法比较,两种方法结果一致,表明本法适用于维生素D3制剂中有关物质检查。