HIV-1型前病毒基因检测芯片的研制及应用

摘要

目的研制艾滋病病毒1型(HIV1)前病毒基因检测芯片,并将其应用到临床样本的检测中。方法合成多对引物,经筛选实验后选出6对适宜的引物用于逆转录聚合酶链反应(RTPCR),扩增HIV基因组gag区(保守区)6个HIV目的基因片段,扩增小鼠GAPDH基因片段作为阳性内参片段,PCR扩增辣椒红素基因片段作为阴性对照片段。将上述片段克隆到pMD18T载体上,从中选取3个HIV1目的片段、阳性对照片段和阴性对照片段进行PCR扩增,扩增产物经纯化后点在尼龙膜上,制备成核酸检测芯片。地高辛PCR标记样本核酸与芯片杂交后,用酶联显色,分析结果。结果共检测了98份阳性样本和30个阴性样本,敏感性达939%,特异性为1000%。结论该HIV1前病毒基因检测芯片成本较低,具有较高的特异性和灵敏度,可以用于HIV1感染和母婴传播的早期诊断。