血清、促性腺素、EGF和水对山羊卵母细胞体外成熟的影响(英文)

摘要

为了通过比较培养筛选出能改进和提高山羊卵母细胞体外成熟效率的培养体系 ,培养的山羊卵母细胞以 TCM-199为基础培养液 ,添加 :(1) 10 %血清 (胎牛血清 (FBS)或发情山羊血清 (EGS) ) +2 0 m g/ L促黄体素 (L H) +10 mg/ L促卵泡素 (FSH) +1m g/ L 雌二醇 (E2 ) ;(2 ) 10 % EGS+促性腺素 (L H∶ FSH=5 mg/ L∶ 0 .5 m g/ L 或 2 0 mg/ L∶ 10mg/ L )或者 0 .0 75 IU / m L人绝经期促性腺素 (HMG) +1mg/ L estradiol 17β;(3) 10 % EGS+0 .0 75 mg/ L HMG+10～ 2 0 μg/ L EGF。此外 ,以 M199+10 % EGS+0 .0 75 mg/ L HMG+10～ 2 0 μg/ L EGF为培养基 ,溶解于自制超纯水或储存的商品化超纯水来培养卵母细胞。培养条件为 38℃ ,5 % CO2 。培养 2 4 h后 ,在体式显微镜下统计处于 M 期的卵母细胞比例。结果显示 :在卵母细胞成熟液中添加 10 % EGS比 10 % FBS的成熟培养效果好 ;添加 HMG能够促进卵母细胞的成熟 ,其效果比添加不同比例的 L H/ FSH好 ;成熟液中添加 10～ 2 0μg/ L EGF能促进卵母细胞的成熟 ,但成熟率没有明显提高 ;新鲜的超纯水对于卵母细胞的培养是必要的。结论 :新鲜超纯水配制的 M199+10 % EGS+0 .0 75 IU / m L HMG+10～ 2 0μg/ L