survivin反义寡核苷酸逆转顺铂诱导的人肺腺癌细胞凋亡耐受作用

摘要

目的探讨survivin反义寡核苷酸逆转人肺腺癌细胞对顺铂诱导的细胞凋亡耐受的效应。方法1.常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin反义寡核苷酸(ASODN)体外转染细胞。2.采用二苯胺反应法(DPA)测定DNA片段化、激酶法检测Caspase-3酶活性及流式细胞术检测细胞凋亡率(AI),评价细胞凋亡程度。3.采用MTT法测定细胞存活率和生长抑制率,计算半效抑制浓度(IC50)及耐药倍数(RI)。结果1.单用ASODN转染组DNA片段化比率、细胞凋亡率和Caspase-3相对活性分别增高至(43.55±6.07)%、(34.03±2.25)%和1.1298±0.2502,和各对照组相比较,均有显著性变化(P<0.01);而ASODN和CDDP联用组上述凋亡指标增高更为明显,分别达(76.73±2.04)%、(65.85±5.47)%和1.6805±0.2758(P<0.05)。2.转染组A549/CDDP细胞生长抑制显著,单用转染组和联合CDDP组生长抑制率分别增高达59.3%和83.7%(P<0.05)。3.ASODN转染后CDDP对细胞IC50由(225.03±10.59)μmol/L减低至(158.84±4.256)μmol/L,其RI由11.9减为8.39。结论survivin反义寡核苷酸体外转染可降低耐顺铂人肺腺癌细胞的凋亡阈值,从而较大程度上逆转其对顺铂诱导的细胞凋亡耐受。