一种快速简便构建DNA病毒测序文库的方法

摘要

为了对1株中国棉铃虫核型多角体缺失病毒HZ-9进行基因组测序,采用了一种新的方法,通过超声波振断HaBacHZ9细菌人工染色体质粒(bacterialartificialchromosomeplasmid,Bacmid)基因组DNA,用Taq酶在DNA片段两端加腺嘌呤A,胶回收后得到预期的1-2kb的DNA片段,然后与pGEM-Teasy载体连接,构建了中国棉铃虫缺失病毒HaBacHZ9的亚克隆文库。结果随机挑选10个克隆子酶切分析,显示9个克隆子有1500bp左右的插入片断,并对HaBacHZ9进行了全基因组测序。结论成功构建了HaBacHZ9的DNA测序文库,为HZ-9功能基因组学研究奠定了基础,这是一种简单快速的构建DNA病毒测序文库的方法。