可溶性CD40配体对Raji细胞的生物学作用研究

摘要

目的 研究可溶性CD40配体(Soluble CD40 ligand,sCD40L)对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株增殖、凋亡、细胞周期以及MAPK通路相关因子ras、raf、MEK、ERK1/2 mRNA及蛋白表达的影响.方法 取对数期生长期Raji细胞,分为对照组和分别含sCD40L 0.25、0.5、1、2、4μg/mL的实验组,培育24、48、72 h后采用CCK-8法检测sCD40L对Raji细胞体外增殖情况的影响;将Raji细胞分为细胞对照组和含4μg/mL sCD40L的实验组,分别培育24、48、72 h后利用AnnexinV-FITC/PI双染法检测对Raji细胞凋亡的影响;流式细胞术检测对细胞周期的影响;实时荧光定量PCR法检测对ras、ratf、MEK、ERK1/2 mRNA表达的影响;以Western blot测定ras、raf、MEK、ERK1/2蛋白水平的变化.结果 不同浓度sCD40L对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞有抑制作用,呈剂量一时间效应关系;sCD40L可诱导Raji细胞的凋亡并阻滞细胞在G0/G1期;sCD40L与Raji细胞的ras、raf、MEK、ERK1/2 mRNA及其蛋白的表达有抑制作用.结论 sCD40L在体外可抑制Raji细胞增殖并促进其凋亡,干扰Raji细胞的细胞周期,其作用机制可能与下调ras、raf、MEK、ERK1/2的mRNA及蛋白的表达有关.